尊龙凯时人生就博提供的MOPC小鼠少突胶质前体细胞培养指导手册，旨在为研究人员提供详细的细胞培养条件和操作流程，以确保实验的顺利进行。

一、细胞培养条件

细胞名称：MOPC小鼠少突胶质前体细胞
生长特性：贴壁生长
冻存条件：无血清冻存液（货号：C7001）
培养体系：DMEM+10%FBS+1%双抗

传代方法：首次传代建议1:2，传代后需每两天更新培养基。请使用无菌离心管收集培养基以便进行对比实验。如果对比培养效果不理想，建议直接购买我们的完整培养基。

二、细胞处理

收到细胞后，应培养至良好状态，并用完全培养液灌满，封好瓶口以确保运输安全。使用75%酒精对细胞瓶进行消毒，然后放入超净台内开展无菌操作。将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱，静置3-4小时以稳定细胞状态，之后进行进一步处理。记录前三天的细胞状态并拍照保存（建议不同倍数各拍一张），因为这将成为重要的售后依据，如果未提供照片，则默认为状态良好。

三、细胞培养步骤

a. 细胞传代

1. 若细胞未超过80%汇合度，收集培养液并保留5ml，放入37℃、5%CO2孵箱中继续培养；
2. 当细胞密度超过80%，可进行传代，具体步骤如下：

1）弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS冲洗细胞1-2次；
2）加入0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml，置于37℃培养箱消化1-2分钟，待大部分细胞变圆并脱落时，迅速终止消化；
3）轻轻吹打细胞以确保完全脱落，吸出悬液并转移至15ml离心管中，在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，重悬于1-2ml完全培养基中；
4）按照1:2比例分瓶传代（两个T25瓶），补充新鲜完全培养基至每瓶5-8ml，最后放入37℃、5%CO2培养箱培养。

b. 细胞冻存

1. 当细胞覆盖培养瓶面积达到80%时，弃去培养液并用PBS洗涤一次；
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml，观察细胞回缩及变圆后，加入5ml完全培养液以终止消化；
3. 将细胞悬液转移至15ml离心管中，1000RPM离心5分钟；
4. 弃去上清，加入1ml无血清冻存液（货号：C7001）充分混匀，然后转移至冻存管，最后直接放入-80℃冰箱保存。

c. 细胞复苏

1. 从液氮中取出细胞冻存管，迅速置于37℃水浴中解冻，待冻存管中无冰晶后用75%酒精消毒；
2. 将细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，1000RPM离心5分钟；
3. 弃去上清，用5ml完全培养基重悬，并接种至T25培养瓶中，放于37℃、5%CO2的培养箱中培养；
4. 次日换用新鲜完全培养基继续培养。

四、注意事项

在细胞运输过程中，部分细胞可能因贴壁不牢而脱落。这是正常现象。如脱落细胞较多，可将培养液收集至离心管中，进行离心处理并补充培养基，按比例进行分瓶传代。

五、售后条款

1. 细胞出现问题的可重发情况包括：运输损坏、细胞污染等；如量大且未提供照片证明，则默认为质量合格。在收到产品后7天内，需提供真实的实验结果以便于核实；
2. 不予重发的情况包括：客户自身操作不当造成的污染或状态恶化等。

在您选择尊龙凯时人生就博的细胞产品时，我们承诺提供最优质的服务和支持，以确保您的实验成功。